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——高分辨率成像的關鍵要素
一、浸沒油原理與光學意義
浸沒油通過填補物鏡前端與樣本蓋玻片之間的空氣間隙（n=1.0），匹配玻璃折射率（n≈1.515），顯著提升數值孔徑（NA）并減少光散射。Leica油鏡（如100x/1.47 NA）通過浸沒油可實現：
分辨率提升約30%（理論分辨率=0.61λ/NA）
增強圖像對比度與信噪比
減少球面像差（尤其厚樣本成像時）
二、Leica鏡油核心技術參數
型號 折射率(n) @23°C 動態粘度(cSt) 適用場景
Type F 1.518 (±0.0005) 300 常規熒光/明場（ISO 8036標準）
Type DF 1.515 150 快速掃描活細胞成像
UV兼容型 1.518 280 多光子/深紫外激發
關鍵特性：
嚴格色散匹配（Δn<0.0003 across 450-700nm）
零熒光背景（經HPLC純化）
抗結晶配方（長期穩定性＞2年）
三、操作規范與常見問題
1. 正確使用方法
滴加量：1-2滴（覆蓋物鏡前透鏡80%面積）
清潔流程：
復制
1. 用Leica專用清潔紙（無纖維殘留）
2. 二甲苯擦拭殘留油漬（僅限非塑料部件）
3. 乙醇去除溶劑殘留（純度≥99.7%）
2. 故障排除
現象 可能原因 解決方案
圖像邊緣模糊 油層中有氣泡 輕轉調焦旋鈕排除氣泡
熒光強度衰減 油劑光降解 更換UV穩定型鏡油
油劑結晶 溫濕度驟變 恒溫儲存（18-25°C）
四、特殊應用場景優化
活細胞成像：使用低粘度Type DF油（剪切力降低60%）
三維重構：需每4小時補油（蒸發率＜0.1μL/h @37°C）
共聚焦成像：選擇抗光漂白型號（透光率＞99% @488/561nm）
五、技術驗證數據
Leica鏡油經ISO 10993-5細胞毒性認證，與主流封片劑（如ProLong Diamond）兼容性測試：
無交聯反應（接觸48小時后ΔRI＜0.0001）
熒光淬滅率＜2%/h（對比競品平均5-8%/h）
文檔設計建議：
添加Leica提供的折射率-波長曲線圖
附錄包含物鏡兼容性對照表（如HC PL APO系列）
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